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4.打开某一个微信组.点击右上角.往下拉."消息免打扰"选项.勾选"关闭"(也就是要把"群消息的提示保持在开启"的状态.这样才能触系统发底层接口。)
【央视新闻客户端】
简单来说,基因敲出就是 破坏原来基因的结构,让其失去活性,或者去除掉生物体内这个基因 ,以此来观察细胞的表型变化,是研究某基因功能的研究手段。一般都是通过同源重组的方法来改变原来基因的结构,达到敲除某个基因的目的 。
内源性基因就是指宿主自身的基因 ,基因整合就是两个非同源基因连接起来,所以内源性基因整合就是宿主自身的非同源基因相互结合。
检测目的基因是否导入到载体上,一般可以通过电泳的方法检测 ,因为插入目的基因片段的重组载体其分子量大小 、碱基对数等都有变化。
检测重组载体是否导入受体细胞则是通过 导入了重组载体的受体细胞表型变化来鉴定,例如一些质粒上都有一些特定性状的表达基因,重组质粒则是由于插入了目的基因而破坏了原有该特定性状基因的结构 ,因此没有该性状表现,由此可以筛选出来 。
2007年度诺贝尔生理学或医学奖 什么是“基因打靶 ”或基因敲除
基因敲除(geneknockout),是指对一个结构已知但功能未知的基因 ,从分子水平上设计实验,将该基因去除,或用其它顺序相近基因取代,然后从整体观察实验动物 ,推测相应基因的功能。这与早期生理学研究中常用的切除部分-观察整体-推测功能的三部曲思想相似。
基因敲除除可中止某一基因的表达外,还包括引入新基因及引入定点突变。既可以是用突变基因或其它基因敲除相应的正常基因,也可以用正常基因敲除相应的突变基因 。 基因敲除是80年代后半期应用DNA同源重组原理发展起来的一门新技术。80年代初 ,胚胎干细胞(ES细胞)分离和体外培养的成功奠定了基因敲除的技术基础。1985年,首次证实的哺乳动物细胞中同源重组的存在奠定了基因敲除的理论基础 。到1987年,Thompsson首次建立了完整的ES细胞基因敲除的小鼠模型。此后的几年中 ,基因敲除技术得到了进一步的发展和完善。
基因敲除的技术路线如下:
(1)构建重组基因载体﹔
(2)用电穿孔、显微注射等方法把重组DNA转入受体细胞核内﹔
(3)用选择培养基筛选已击中的细胞﹔
(4)将击中细胞转入胚胎使其生长成为转基因动物,对转基因动物进行形态观察及分子生物学检测 。
基因敲除的靶细胞目前最常用的是小鼠ES细胞。基因敲除的技术路线虽不复杂,但由于高等真核细胞内外源DNA与靶细胞DNA序列自然发生同源重组的机率非常低 ,约为百万分之一,要把基因敲除成功的细胞筛选出来是一件非常困难的工作。因此,同源重组的筛选和检测就成了基因敲除技术所要解决的关键问题 。目前已有多种筛选方法 ,其中1988年犹它大学的Capecchi教授的研究组发展的正负双向选择系统适用范围宽且效率较高。
基因打靶――主要是针对肿瘤和先天遗传性疾病而言,这些疾病的共同点是出现明显的基因改变(如基因突变、缺失 、重叠等),肿瘤即由癌基因的突变或抑癌基因的失活引起。
医学科研工作者通过各种手段,如插入自杀基因、RNA干扰、反义寡核苷酸等技术针对这些突变基因的DNA或RNA序列设计出特定的分子片断 。
通过有效的基因转染方法让这些分子片断在肿瘤细胞复制 、转录、翻译等过程中发挥其特定的靶向干预作用 ,以抑制肿瘤细胞的增殖、分化和侵袭,进而从基因水平达到治疗肿瘤的作用。
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